1.采集污水
取一容器在图书馆附近的龙腾湖采集水样,并置于适合温度下培养。
2.培养基的制备
按照BG-11培养基的配方配置适量培养基,将配好的培养基于高压灭菌锅内121℃灭菌20min,待用。液体培养基可分装入已灭菌的试管中;固体培养基(在培养液内加入1.5%琼脂)趁热在超净台中倒入预先灭过菌的培养皿中冷却。
3.分离藻种
在超净工作台上采用平板划线分离法和稀释法分离藻种。
㈠、平板划线分离法
①、右手持接种环于酒精灯上灼烧灭菌,待冷。
②、用灭菌的接种环蘸取藻液。
③、左手持培养皿,用拇指、食指及中指将皿盖打开一侧。
④、将已取藻液的接种环伸入培养皿,在平板表面轻轻划线。
⑤、划线完后,灼烧接种环,将培养皿盖好,置恒温箱中培养。
㈡、稀释法分离
取少量藻液于适量液体培养基中稀释,如此反复,直至稀释到所需浓度为止。
4.藻种扩培
取3只锥形瓶,分别加入150mL培养基,于高压灭菌锅中灭菌,在超净工作台对稀释法分离得到的藻种进行扩培。
5.藻种鉴定
取少量未知藻种的藻液于载玻片上,在显微镜下观察,以确定藻种。
6.生长曲线的制备
取8只锥形瓶,按照1:9的比例加入藻种与培养基,之后每隔2天测定OD值,记录相关数据并绘制生长曲线。
7.藻种保存
㈠、玻璃化超低温保存法
①、培养基的制备(BG11培养基的制备)
②、实验用小球藻的准备
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